生物素标记烟曲霉素,Biotinylated Cycloheximide,Fumagillin的生物素标记策略
物产品名稱称:动物素符号烟曲霉素,Biotinylated Cycloheximide,Fumagillin的动物素符号攻略 生物制品素标示原则1. 标志位点使用Fumagillin:环氧树脂环:反應亲水性高,但可能性毁掉生态学亲水性,需妥当选用。羟基/氨基:优先权选泽大分子末高端的羟基(如C-22位)或引出氨基对接管,经过酰胺键或酯键对接动物素。Cycloheximide:氯代苯基:可利用亲核加入不起作用引用线接头(如氨基或羧基)。环己酮:需守护酮基,预防副现象。2. 化工偶联技术会直接标签:NHS-微生物素:符合于含氨基的Fumagillin衍微生物,在pH 7-8生活条件下行成保持稳定酰胺键。微生物素-马来酰亚胺:若Fumagillin含巯基(如借助半胱氨酸呈现),可借助迈克尔加强反响偶联。隐性标签:引用管接头:使用的聚乙二醇(PEG)或己二酸二酰肼(ADH)用作距离臂,挺高标出物的水阴离子型和灵巧性。点耐腐蚀:使用叠氮化物-炔烃环加强的反应(CuAAC或SPAAC)控制快速、特女性朋友符号。3. 标上成功率提高不起作用环境:工作温度:空调温度至40℃,以防高温天气出现Fumagillin挥发。稀释剂:DMSO或DMF(需的控制正比,制止血清质转性)。pH:中性化至弱强碱(pH 7.5-8.5),有助于酰胺键产生。纯化方式:HPLC(C18柱):分割未的反应的生物制品素和副乙酰乙酸。透析或超滤膜:删去小团伙不溶物,刷出高色度标记图片物。和谐信息提示:仅广泛用作科研课题,不许广泛用作人身体实验报告!wyh